肝缺血再灌注幼鼠脑损伤时血清外泌体与小胶质细胞焦亡的关系

作者：魏敏; 贾莉莉; 王一丹; 吕景淑; 盛明薇; 孙英; 翁亦齐; 喻文立^*

来源：中华麻醉学杂志, 2022, 42(07): 831-835.

• 肝
• 再灌注损伤
• 外泌体
• 小神经胶质细胞
• 细胞焦亡
• 脑损伤

目的评价肝缺血再灌注幼鼠脑损伤时血清外泌体与小胶质细胞焦亡的关系。方法清洁级健康雄性SD大鼠46只, 2～3周龄, 体重40～60 g, 按照随机数字表法分为4组:假手术组(S组, n=10)、缺血再灌注组(I/R组, n=13)、假手术幼鼠血清外泌体处理组(S-Exosome组, n=10)和缺血再灌注幼鼠血清外泌体处理组(I/R-Exosome组, n=13)。I/R组建立70%肝缺血再灌注损伤模型。再灌注6 h后, 取S组和I/R组幼鼠血清分别提取外泌体, S-Exosome组、I/R-Exosome组经尾静脉分别注射S组或I/R组血清外泌体混悬液100 μl。采用Western blot法测定S组和I/R组血清外泌体标记蛋白CD9、CD81表达水平。各组均于相应处理后6 h时取血清及海马组织标本, 采用Western blot法检测海马NOD样受体蛋白3(NLRP3)、消皮素D(GSDMD)、半胱天冬酶1前体(pro-caspase-1)、半胱天冬酶1剪切体(cleaved-caspase-1)和凋亡相关微粒蛋白(ASC)表达水平, 免疫组织化学法检测海马组织GSDMD表达水平;采用ELISA法检测血清和海马组织IL-1β、IL-18、TNF-α以及血清S100β、NSE的水平;I/R-Exosome组取3只大鼠, 经尾静脉注射PKH26红色荧光标记的血清外泌体, 采用免疫荧光技术观察外泌体与小胶质细胞共定位情况。结果与S组比较, I/R组血清CD9和CD81表达上调, I/R组及I/R-Exosome组海马组织NLRP3、GSDMD、cleaved-caspase-1、ASC表达上调, 血清及海马组织IL-18、IL-1β、TNF-α水平、血清S100β、NSE水平升高(P<0.05), S-Exosome组上述指标差异无统计学意义(P>0.05)。I/R组及I/R-Exosome组GSDMD阳性表达明显增多, S组及S-Exosome组未见明显阳性表达;免疫荧光结果示外泌体与小胶质细胞共定位现象。结论幼鼠肝缺血再灌注诱发脑损伤的机制可能与血清外泌体介导小胶质细胞焦亡有关。

• 单位
  天津医科大学; 天津市第一中心医院