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摘要
目的构建铜绿假单胞菌PA14细胞株的PA0745基因突变株,并验证其致病性。方法采用同源重组原理构建铜绿假单胞菌PA0745基因缺失株和点突变株。利用质粒抗性和营养缺陷进行筛选,获得铜绿假单胞菌突变株E126A、E146A和ΔPA0745。分析突变PA0745基因后,PA14细胞株生长特性及致病性变化。结果成功构建PA14细胞株的PA0745基因突变株E126A、E146A和ΔPA0745。生长曲线测定结果表明,PA0745基因突变后,不影响PA14细胞株正常生长。细胞侵染实验结果显示,相较于PA14细胞株,E126A、E146A和ΔPA0745对RAW264.7侵染能力分别下降了29.51%、60.66%和79.34%。结论本研究成功构建了PA14细胞株的PA0745基因突变株,并初步验证了PA0745基因的功能,这对开发抗菌药物有指导意义。
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