中药健脾益肺方对EAAT2表达的影响

作者：李惠珍; 任展能; 李雅青; 杨碧莹^*; 杜宝新

来源：中国比较医学杂志, 2019, 29(04): 7-14.

• 健脾益肺方
• 谷氨酸
• 星形胶质细胞
• EAAT2
• 神经元

目的探索健脾益肺方(JPYF)对谷氨酸转运体2(EAAT2)表达的影响及可能机制。方法取新生24 h内的SD幼鼠,无菌条件下取出幼鼠大脑皮层星形胶质细胞,分离、提纯、原代培养以进行后期实验;调整适宜的细胞浓度分5组种板,分别为A:谷氨酸组(250μmo L/L),B-D:JPYF方(0.25、0.5、1 g/kg)+谷氨酸组,E:正常组,以JPYF方(终浓度为0.25、0.5、1 g/kg)作用B-D组24 h后,谷氨酸250μmo L/L作用A-D组4 h诱导建立体外培养原代星形胶质细胞损伤模型;采用噻唑蓝(MTT)法测定各组星形胶质细胞存活率,紫外比色法检测培养基上清谷氨酸浓度,细胞免疫荧光法(immunofluorescence)、Western blot检测星形胶质细胞EAAT2的表达量,IF法检测原代脊髓神经元细胞存活情况。结果 JPYF方可显著保护星形胶质细胞(P<0.01),提高谷氨酸转运蛋白的表达(P<0.05,P<0.01),降低细胞外液谷氨酸浓度(P<0.05,P<0.01),减少神经元损害(P<0.05,P<0.01),在0.25～1g/L的剂量上呈现一定的量效关系。结论 JPYF方可减少谷氨酸对原代脊髓运动神经元细胞的损伤,其机制可能是JPYF方提高EAAT2的表达,降低细胞外液谷氨酸浓度,从而起到保护神经元的作用。

• 单位
  广东省中医院