数字RT-PCR技术检测H3N2亚型猪流感病毒方法的建立

作者：唐连飞; 禹思宇; 周宇

来源：中国畜牧兽医, 2017, 44(06): 1847-1853.

DOI：10.16431/j.cnki.1671-7236.2017.06.038

• 猪流感病毒
• H3N2亚型
• 分子信标探针
• 数字RT-PCR
• 实时荧光定量PCR
• 灵敏性
• 特异性
• 重复性

试验旨在利用新型荧光探针——分子信标,建立一种检测猪流感病毒的新方法。根据H3N2亚型猪流感病毒(swine influenza virus,SIV)的H3和N2基因的保守基因序列,分别设计并合成了特异性引物和分子信标探针,利用数字RT-PCR技术检测H3N2亚型SIV。结果显示,该数字RT-PCR检测方法与其他主要相关病毒均不发生交叉反应,重复性良好;对猪H3N2流感病毒而言,最低可检测到106倍稀释的病毒株。数字RT-PCR方法能够对RNA模板定量分析。在H3N2SIV的鉴定上,数字RT-PCR方法较实时荧光定量PCR方法更灵敏、准确。

• 单位
  湖南出入境检验检疫局检验检疫技术中心; 惠州出入境检验检疫局