CBX7对维持肺癌干细胞表型及化疗敏感性的影响

作者：李微蕾; 李镇; 卓越; 张璐璐; 梁冬^*

来源：现代肿瘤医学, 2023, 31(15): 2751-2756.

• 色素框同源蛋白7
• 肺癌
• 肿瘤干细胞
• 化疗敏感性
• CD44

目的:探讨色素框同源蛋白7(CBX7)对肺癌干细胞(LCSCs)表型和化疗敏感性的调节作用及部分潜在机制。方法:培养肺癌A549、NCL-H460和H1299细胞株，分选CD44+细胞进行后续实验。转染后，将CD44+LCSCs分为空白组、阴性组(转染空载体)、shCBX7(沉默CBX7表达)。细胞计数试剂盒-8(CCK-8)测定和集落形成实验分析细胞增殖能力和对化疗药物的敏感性，使用染色质免疫沉淀(ChIP)和双荧光素酶报告基因测定法验证CBX7和CD44之间的关系，Western blot检测蛋白含量。结果:成功的从A549、H460和H1299细胞中富集了CD44+LCSCs, CD44+细胞百分比为97.1%～99.5%。与CD44-细胞相比，CD44+细胞中CBX7、CD44、Sox2、Nanog蛋白表达量更高(P<0.001),且CD44+H460细胞CBX7蛋白表达量最高(P<0.05),可用作后续沉默CBX7表达实验。shCBX7组沉默CBX7表达后，CD44+H460细胞的增殖率、集落形成能力、肿瘤球形成数量及细胞内CD44、Sox2、Nanog蛋白表达量明显低于空白组和阴性组(P<0.05)。ChIP-qPCR实验结果显示CBX7可与CD44基因启动子结合。CBX7过表达也显著增加了CD44启动子的荧光素酶活性(P<0.05)。此外，与空白组DDP(0.98±0.04)μmol/L和DOX(17.5±0.97)μmol/L相比，阴性组CD44+H460细胞对DDP(0.87±0.03)μmol/L和DOX(16.3±1.04)μmol/L的IC50基本一致(P>0.05);与阴性组相比，shCBX7组CD44+H460细胞对DDP和DOX的IC50分别降低为(0.08±0.01)μmol/L和(0.43±0.03)μmol/L(P<0.05)。结论:CBX7可维持LCSCs的干性特征并提高化疗敏感性，在肺癌临床治疗中具有潜在的研究价值。

• 单位
  海南省第三人民医院