截短型水痘-带状疱疹病毒糖蛋白E的原核表达及免疫原性评价

作者：李春明; 王丽; 马成; 刘佳羽; 许源航; 牟忠梅^*

来源：中国生物制品学杂志, 2021, 34(11): 1295-1299.

DOI：10.13200/j.cnki.cjb.003463

• 水痘-带状疱疹病毒
• 糖蛋白E
• 原核表达
• 免疫原性

目的原核表达截短型水痘-带状疱疹病毒(varicella-zoster virus,VZV)糖蛋白E(glycoprotein E,gE),并评价其免疫原性。方法通过GenBank获取VZV gE的第25～537位氨基酸(gE25-537)相应的核酸序列,经密码子优化,合成质粒pUC-VZV-gE25-537-His;以其为模板扩增目的片段,克隆至载体pET-21b,构建重组表达质粒pET-21b-VZV-gE25-537-His,转化感受态E. coli BL21(DE3),经IPTG诱导表达,包涵体经Urea溶解后,进行镍离子层析柱纯化。将纯化蛋白与弗氏佐剂混合,经皮下多点免疫小鼠,共免疫3次,末次免疫2周,经尾部静脉采血,分离血清,检测血清效价和中和效价。结果重组表达质粒pET-21b-VZV-gE25-537-His经双酶切及测序鉴定证明构建正确。目的蛋白相对分子质量约62 000,主要以包涵体形式表达,纯化后纯度达85%,且可与鼠抗gE单克隆抗体发生特异性结合。免疫3次后,小鼠血清效价可达1∶54 954,中和效价为1∶21.75。结论原核表达了VZV gE,该蛋白具有良好的免疫原性,有望成为制备带状疱疹疫苗的候选抗原。

• 单位
  上海倍谙基生物科技有限公司; 赤峰学院附属医院