猪FMDV受体整联蛋白β1亚基LBD多克隆抗体的制备和初步应用

作者：高闪电; 常惠芸; 独军政; 王景锋; 宋帅; 谢庆阁

来源：中国人兽共患病学报, 2008, (11): 999-1001+1005.

• 口蹄疫病毒
• 受体
• 整联蛋白β1亚基
• 配体结合域
• 多克隆抗体 FMDV
• receptor
• integrin β1 subunit
• Ligand-binding domain
• polyclonal antibody

目的表达口蹄疫病毒受体猪源整联蛋白β1亚基配体结合域β1LBD,制备兔抗β1LBD多克隆抗体检测β1p-CHOK1细胞β1亚基的表达。方法利用PCR方法扩增整联蛋白β1LBD基因片段,经BamHⅠ和XhoⅠ进行双酶切后与pGEX-4T-1原核表达载体相连,构建的pGEX-β1LBD重组表达质粒,转化大肠杆菌BL21(DE3)菌株,经IPTG诱导表达,SDS-PAGE鉴定融合蛋白的表达并提取包涵体,纯化目的蛋白。然后用纯化的蛋白免疫新西兰大耳白兔制备其多克隆抗体,以ELISA和Western blot方法分别鉴定抗体的效价和特异性,并用制备的抗体以间接免疫荧光抗体法对β1p-CHOK1细胞中β1...

• 单位
  中国农业科学院兰州兽医研究所; 农业部; 家畜疫病病原生物学国家重点实验室