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摘要
目的 探讨组蛋白H4在脂多糖诱导的小鼠急性呼吸窘迫综合征（ARDS）中对肺泡巨噬细胞（AM）极化的作用。方法 （1）将无特定病原体级C57BL/6雄性小鼠随机分为对照组和2、4、6、8 mg/kg脂多糖组，每组6只。采用一次性气管滴注法，后4组小鼠予相应剂量脂多糖染毒，对照组小鼠予等体积的0.9%氯化钠溶液。12 h后，采集各组小鼠动脉血进行血气分析，取肺组织观察肺水肿和病理组织学改变情况，采用酶联免疫吸附实验检测小鼠支气管肺泡灌洗液（BALF）中组蛋白H4水平，并采用贴壁法分离5组小鼠AM。（2）采用贴壁法分离正常小鼠AM，随机分为对照组、组蛋白H4损伤组、BALF损伤组和抗组蛋白H4中和抗体（anti-H4）干预组。组蛋白H4损伤组AM中加入终质量浓度为20 mg/L的组蛋白H4;BALF损伤组和anti-H4干预组AM中均加入经剂量为6 mg/kg体质量脂多糖染毒小鼠的BALF上清200μL，后者同时加入终质量浓度为25 mg/L的anti-H4抗体；对照组AM中加入等体积的磷酸盐缓冲液溶液。刺激12 h后，收集AM。（3）采用实时定量聚合酶链式反应法检测AM中肿瘤坏死因子-α(Tnfa)、白细胞介素-1β(Il1b)、分化抗原206 (Cd206)和精氨酸酶1(Arg1)的mRNA相对表达水平。结果 （1）与对照组比较，4个脂多糖组小鼠均出现呼吸急促，肺组织出现炎症反应和肺水肿，均呈剂量依赖性加重。随着脂多糖染毒剂量的增加，小鼠动脉血氧分压与吸入气中氧浓度分数比值下降（P<0.05），肺湿/干质量比值、BALF中组蛋白H4水平和AM的Tnfa、Il1b mRNA相对表达水平均增加（P值均<0.05）。其中，6和8 mg/kg脂多糖组小鼠均出现ARDS。6和8 mg/kg脂多糖组小鼠BALF中组蛋白H4水平和AM的Tnfa、Il1b mRNA相对表达水平均高于其余3组（P值均<0.05）。（2）与对照组比较，组蛋白H4损伤组、BALF损伤组AM中Tnfa和Il1b mRNA相对表达水平均升高（P值均<0.05）,Cd206和Arg1 mRNA相对表达水平均下降（P值均<0.05）。与BALF损伤组比较，anti-H4干预组AM中Tnfa和Il1b mRNA相对表达水平均下降（P值均<0.05）,Arg1 mRNA相对表达水平升高（P<0.05）。结论 脂多糖可诱导小鼠BALF中组蛋白H4水平出现剂量依赖性的升高；组蛋白H4通过激活AM向M1型极化，驱动ARDS的发生发展。拮抗组蛋白H4以干预AM向M1型极化可能是治疗ARDS的靶点。
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