马尾藻多糖拮抗LPS诱导的巨噬细胞极化及铁死亡

作者:袁慧情; 胡佳敏; 刘思溢; 侯鉴基; 吴科锋; 罗辉; 吴斌华*
来源:中国免疫学杂志, 2023, 39(10): 2034-2040.

摘要

目的:研究马尾藻多糖(SP)对抗脂多糖(LPS)诱导的巨噬细胞极化和铁死亡,以明确SP是否存在对免疫功能的调节作用。方法:分离、提纯和鉴定SP,建立LPS诱导的小鼠巨噬细胞RAW264.7炎症模型。采用CCK-8法检测SP对巨噬细胞增殖的影响,采用实时荧光定量PCR (RT-qPCR)法和Western blot法分别检测巨噬细胞极化相关指标CD80、CD163、IL-6、IL-10、精氨酸-1(Arg-1)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、TNF-α含量。为了解巨噬细胞铁死亡情况,以活性氧(ROS)检测试剂盒检测ROS含量,并以Western blot法检测谷胱甘肽过氧化物4(GPX4)的表达。结果:成功分离SP,并鉴定其不属于呋喃糖。高浓度SP对巨噬细胞具有促增殖作用,并对LPS诱导的细胞增殖抑制具有显著的保护作用。SP能使RAW264.7细胞向M2极化,并且能拮抗LPS诱导的M1极化。LPS可诱导巨噬细胞内ROS显著增加,SP则可使其ROS水平显著降低。LPS诱导巨噬细胞的GPX4蛋白表达水平显著降低,高浓度的SP能显著上调其表达(P均<0.05)。结论:SP诱导巨噬细胞向M2极化,拮抗LPS诱导的巨噬细胞M1型极化和铁死亡。