间接竞争酶联免疫分析法快速检测决明子中黄曲霉毒素B₁的研究

作者：张磊; 林煜伦

来源：广东化工, 2023, 50(21): 20-22+29.

DOI：10.3969/j.issn.1007-1865.2023.21.007

• 黄曲霉毒素B1
• 间接竞争酶联免疫分析法
• 样品前处理
• 决明子
• 一步稀释法

目的：建立适用于中药决明子中黄曲霉毒素B1（aflatoxin B1,AFB1）快速检测的间接竞争酶联免疫分析法（indirect competitive enzyme linked immunosorbent assay,ic-ELISA）。方法：首先采用棋盘滴定法优化抗原抗体最佳浓度，建立抑制曲线，然后以显色值和灵敏度为评价指标筛选样品的提取和稀释方法。对所建立的方法进行方法学考察，最后用于实际样品检测。结果：经过优化，确定样品的最佳提取溶剂为乙腈-甲醇溶液（90∶10,v/v），稀释溶液为甲醇-PBS溶液（10∶90,v/v），稀释倍数为20倍。方法的半数抑制浓度为0.078 ng/mL，线性范围为0.016～0.25 ng/mL，回收率为85.00%～109.2%,RSD为0.45%～9.08%。采用所建立的方法对25批决明子进行了检测，经液相色谱-串联质谱法确证，超过限量标准的样品的假阳性率小于5%。结论：本文所建立的ic-ELISA灵敏、简便，适用于决明子中AFB1的快速筛查，但仍存在一定的假阳性率，后续还需要对产生干扰的基质因素进行研究并消除，进一步提高检测的准确度。

• 单位
  广东药科大学; 国家中医药管理局