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摘要
为研究羊口疮病毒(ORFV)VIR蛋白的生物活性，扩增了绿色荧光蛋白基因EGFP和ORFV的VIR基因，构建了真核表达载体pVAX1-EGFP和pVAX1-VIR-EGFP,转染至BHK-21细胞，在荧光显微镜下进行了EGFP和VIR与EGFP融合蛋白的绿色荧光检测，用ORFV的全病毒血清作一抗，进行了Western blot检测，应用生物信息学方法，构建了VIR蛋白和VIR与EGFP融合蛋白的三级结构并进行了比较，进行了细胞表位预测。结果显示，pVAX1-EGFP和pVAX1-VIR-EGFP载体在BHK-21细胞中均表达出了绿色荧光，但VIR与EGFP融合蛋白表达的荧光弱于EGFP表达的荧光，Western blot检测出了53 ku左右的融合蛋白条带，说明VIR与EGFP融合蛋白具有较高的特异性。VIR蛋白和VIR与EGFP融合蛋白的三级结构直观地反映了VIR蛋白和VIR与EGFP融合蛋白的差异，预测出VIR蛋白的优势B细胞抗原表位4个，HLA-A*0201限制性CTL优势表位3个，为VIR蛋白的生物学功能研究奠定了基础。
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