目的建立毛冬青药材中毛冬青苷B的HPLC测定方法。方法采用高效液相色谱法,色谱柱:Kromasil C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相:以乙腈-0.1%磷酸梯度洗脱;检测波长为329 nm;流速为1.0 mL·min-1。结果毛冬青苷B在0.3672~3.672μg线性关系良好(r=0.9998),平均回收率为97.26%,RSD=1.16%。结论该方法准确、简便、重现性好,适用于毛冬青苷B的含量测定,有助于完善毛冬青药材的质量控制。