摘要
脂肪酶是一类功能多样且应用广泛的酶,但是由于游离酶酶活易损失且难以分离回收,通常不适合实际应用。为了解决实际应用中游离脂肪酶的稳定性和重复使用性较差的问题,该研究首先使用近平滑假丝酵母发酵生产脂肪酶,然后合成了聚酰胺-胺树枝状大分子接枝的聚甲基丙烯酸甲酯磁性微球(Fe3O4@PMMA/PAMAM),并用多种方法对其进行表征。进一步将Fe3O4@PMMA/PAMAM作为载体用于固定化脂肪酶,最优固定化条件为戊二醛用量0.6 mL、固定化时间5 h、固定化pH 8.0、固定化温度35 ℃,所得的固定化脂肪酶酶活为864 U/g,酶活回收率为74.29%。与发酵液中的游离脂肪酶相比,固定化脂肪酶的热稳定性和pH稳定性均明显增强。在连续循环使用10次后,固定化脂肪酶仍能维持72.23%的酶活。在4 ℃下储存30 d后,固定化脂肪酶仍能保留71.44%的酶活。
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单位生物工程学院; 大连工业大学