壳聚糖/β-甘油磷酸钠/胶原水凝胶包裹IR-780碘化物标记肌腱干细胞的体内示踪研究

作者：杨志金; 徐江; 盛晓飞; 陈康; 段少飞; 李斌; 唐康来^*

来源：创伤外科杂志, 2021, 23(10): 781-787.

• 肌腱损伤
• 肌腱干细胞
• 肌腱组织工程
• IR-780碘化物
• 示踪技术
• 大鼠

目的探讨肌腱干细胞(TSCs)用IR-780碘化物标记之后的生物学特性以及壳聚糖(C)/β-甘油磷酸钠(GP)/胶原(Co)水凝胶包裹IR-780碘化物标记TSCs的体内示踪情况。方法 14只雄性SD大鼠(4周龄,体重约100g),2只用于提取大鼠TSCs,4只用于活体成像观察,8只用于组织学分析。用酶消化法提取大鼠跟腱来源TSCs,用IR-780碘化物标记TSCs,激光共聚焦显微镜下观察IR-780碘化物标记TSCs的细胞内定位,用流式细胞术检测其标记阳性率及对TSCs细胞周期的影响,用CCK-8法检测IR-780碘化物标记TSCs对其增殖的影响,用C/GP/Co水凝胶包裹IR-780碘化物标记的TSCs移植至大鼠跟腱损伤部位。通过全身近红外成像及组织学观察,检测TSCs在大鼠体内的存活及分布情况。结果成功提取大鼠跟腱来源TSCs,并成功制作C/GP/Co水凝胶。IR-780碘化物可成功标记TSCs,其标记阳性率为95.75%,荧光强度显著高于对照组,且对TSCs的细胞周期及增殖无明显不良影响。通过全身近红外成像及组织学观察,很容易检测到大鼠跟腱损伤区域IR-780碘化物标记的TSCs,荧光信号在大鼠身体其他部位几乎检测不到。从1～28d,IR-780碘化物的荧光信号逐渐减弱,但28d时仍能检测到明显荧光。结论 IR-780碘化物可有效标记TSCs,其标记阳性率为95.75%,且对TSCs的细胞周期及增殖无明显不良影响; IR-780碘化物标记的TSCs即使在28d时也有明显可检测的荧光; TSCs包裹在C/GP/Co水凝胶内移植至大鼠跟腱损伤部位,至少存活了4周。C/GP/Co水凝胶包裹TSCs可用于大鼠跟腱损伤的体内实验研究。

• 单位
  中国人民解放军陆军军医大学; 中国人民解放军联勤保障部队第九二〇医院; 第一附属医院骨科