摘要

目的探讨转化生长因子—β_1(TGF-β_1)对体外失神经骨骼肌肌源性干细胞(MDSCs)分化方向的作用。方法采用差速贴壁法分离出大鼠失神经骨骼肌肌源性干细胞,利用TGF—β_1诱导分化。将细胞随机分为两组:A,对照组;B,10 ng/ml TGF—β_1处理组。在相差显微镜下观察细胞生长情况,用免疫细胞化学法、RT-PCR和Western blot检测两组细胞中Ⅰ型胶原蛋白(COL-Ⅰ)、Ⅲ型胶原蛋白(COL-Ⅲ)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、波形蛋白(vimentin)和干细胞抗原-1(Sca-1)的表达水平变化。结果在体外,对照组失神经骨骼肌MDSCs表达和合成COL-Ⅰ、COL-Ⅲ、α-SMA和vimentin的水平极低,而表达和合成Sca-l的水平很高。10 ng/ml TGF—β_1处理后,失神经骨骼肌MDSCs能高表达COL-Ⅰ、COL-Ⅲ、α-SMA和vimentin,而低表达Sca-1。在TGF—β_1,的作用下,失神经骨骼肌MDSCs中COL-Ⅰ的表达水平在第2天时达最高值(12.5591±0.3389),约为对照组的3倍:COL-Ⅲ在5 d时达最高值(0.8956±0.0438),约为对照组的23倍;α-SMA在第5天时达最高值(1.1090±0.0018),约为对照组的18倍;vimentin在5 d时达最高值(0.1794±0.0019),约为对照组的8.5倍:Sca-1在第2天时开始降低,第5天时降低最显著(0.0636±0.0015)。结论 TGF—β_1能诱导体外失神经骨骼肌MDSCs向肌成纤维母细胞(myofibroblasts)分化,促进细胞合成和分泌细胞外基质。

  • 单位
    协和医院; 华中科技大学同济医学院