营养缺乏自噬因子1对骨肉瘤MG-63细胞侵袭转移能力的影响

作者:张瑾; 朱远航; 谢迭来; 赵坤; 华学锋
来源:中华生物医学工程杂志, 2015, (2): 130-133.
DOI:10.3760/cma.j.issn.1674-1927.2015.02.007

摘要

目的:使用小干扰RNA(siRNA)干扰人骨肉瘤MG?63细胞中营养缺乏自噬因子1(NAF1)的表达,观察对NAF1基因的沉默效果,并测定沉默后MG?63细胞生长增殖侵袭能力的变化。方法建立小干扰RNA(NAF1?siRNA)组、阴性对照(NC?siRNA)组、未行处理空白对照组。采用细胞划痕实验检测各组细胞迁移能力不同,采用Transwell法观察各组细胞侵袭能力变化,荧光素酶报告基因检测NF?κB信号通路的活性。结果与空白对照组相比,NAF1?siRNA干预MG?63细胞后,NAF1?siRNA组NAF1的mRNA和蛋白表达水平都明显降低(P<0.01),MMP2蛋白表达水平降低,细胞迁移能力明显降低,NAF1?siRNA组穿过Transwell膜的细胞少于空白对照组,且NF?κB转录活性下降(P<0.01)。结论通过siRNA技术降低NAF1表达可能通过抑制NF?κB通路,影响MMP2蛋白表达水平,抑制骨肉瘤MG?63细胞的迁移和侵袭能力。

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