PLK1基因沉默对K562/A02细胞周期、增殖和耐药性的影响

作者：刘林; 张敏; 邹萍; 田蕾; 刘芳

来源：中国实验血液学杂志, 2006, 14(2): 241-246.

DOI：10.3969/j.issn.1009-2137.2006.02.010

• PLK1 基因沉默
• siRNA 质粒
• K562 细胞/A02细胞
• 细胞周期
• 耐药性

为了探讨小干扰RNA(siRNA)对K562/A02细胞Polo样激酶1(PLK1)基因的抑制作用及其对细胞周期、细胞增殖和耐药性的影响,将构建的针对PLK1 mRNA的siRNA真核质粒,导入K562/A02细胞,用RT-PCR和Western-blot方法分析PLK1基因在转染前后的表达差异;台盼蓝拒染试验检测细胞存活率;流式细胞术(FACS)检测细胞周期和细胞内阿霉素(ADM)的积累量;MTT试验检测细胞对ADM的药物敏感性.结果显示,与对照组相比,转染24和48小时后,siRNA-PLK1质粒转染组的PLK1 mRNA下降(34.7±2.1)%和(56.6±1.5)%,蛋白水平下降(49.9±3.2)%和(62.1±1.7)%;转染24和48小时后,细胞存活率下降了30%和59%;转染48小时后,G2/M期细胞比例提高了2.77倍,同时细胞内ADM积累量显著提高;对ADM药物敏感性的相对率为73.8%.结论:PLK1基因沉默能有效抑制K562/A02细胞生长,使细胞周期停滞在G2/M期,同时使得细胞内ADM积累量提高,对ADM敏感性增强.

• 单位
  华中科技大学同济医学院附属协和医院