重组nesfatin-1蛋白对ox-LDL诱导小鼠巨噬细胞系RAW264.7泡沫化的抑制作用和机制研究

作者：倪亚萍; 符江峰^*; 王敏娟; 李程亮; 常佳; 张栋林

来源：免疫学杂志, 2021, 37(10): 882-887.

DOI：10.13431/j.cnki.immunol.j.20210124

• Nesfatin-1
• ox-LDL
• 巨噬细胞
• 泡沫细胞
• AMPK

目的探究nesfatin-1对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的巨噬细胞泡沫化的作用和分子机制。方法将小鼠RAW264.7巨噬细胞分成3组:对照组(不进行任何处理)、模型组(加入80 mg/L ox-LDL诱导泡沫细胞形成)、nesfatin-1组(加入80 mg/L ox-LDL前2 h加入1×10-8mol/L重组小鼠nesfatin-1蛋白)。油红O染色观察泡沫细胞的形成;试剂盒检测细胞内胆固醇水平[总胆固醇(TC)、游离胆固醇(FC)、胆固醇酯(CE)和胆固醇酯化率(CER)];Western blot检测nesfatin-1蛋白、脂质摄取相关蛋白(CD36和LOX-1)与胆固醇排出调节蛋白(ABCA1和ABCG1)和AMPK通路蛋白[AMPK和磷酸化AMPK(p-AMPK)]表达。结果与对照组相比,模型组中nesfatin-1蛋白表达显著降低,细胞质中出现大量被染成红色的脂质颗粒,TC、FC、CE和CER水平升高,CD36和LOX-1表达上调,ABCA1、ABCG1和p-AMPK/AMPK水平下调,差异均有统计学意义(P<0.05)。与模型组相比,nesfatin-1组中红色的脂质颗粒减少,TC、CE和CER水平降低,LOX-1表达下调,ABCG1和p-AMPK/AMPK水平上调,差异均有统计学意义(P<0.05);而CD36和ABCA1表达变化不大,差异无统计学意义(P>0.05)。结论在ox-LDL诱导的泡沫细胞中nesfatin-1表达下调,nesfatin-1重组蛋白可抑制ox-LDL诱导的巨噬细胞泡沫化,这极可能是通过激活AMPK通路,进而下调LOX-1表达,上调ABCG1表达发挥作用的。

• 单位
  西安医学院第一附属医院