RASSF10基因启动子甲基化对肺癌细胞增殖和凋亡的影响

作者：毕婧; 余蕊; 黄波; 谢召峰^*

来源：临床肿瘤学杂志, 2019, 24(09): 795-799.

• 肺癌
• RASSF10
• 甲基化
• 增殖
• 凋亡

目的检测RASSF10基因启动子在肺癌细胞中甲基化情况,并探讨去5-氮杂胞苷(5-aza-dC)对肺癌细胞增殖和凋亡的影响。方法采用亚硫酸氢盐修饰结合限制性内切酶分析法(COBRA)检测在多种人肺癌细胞系(A549、NCI-H157、SPCA-1、NCI-H460、NCI-H446、QG56)中RASSF10基因的启动子甲基化情况;采用0、5、10μmol/L 5-aza-dC处理甲基化阳性明显的细胞株,采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测细胞中RASSF10 mRNA表达;MTT法检测细胞的增殖活性;流式细胞仪检测细胞的凋亡情况。结果 COBRA法检测到SPCA-1为完全甲基化,H446、H157、H460为部分甲基化,但H157和H460的甲基化程度较弱。5-aza-dC处理后,SPCA-1和H446细胞中RASSF10 mRNA水平显著上调,且呈浓度依赖性,差异具有统计学意义(P<0.05)。5-aza-dC能明显抑制SPCA-1和H446细胞增殖,呈浓度、时间依赖性。0μmol/L 5-aza-dC组、5μmol/L 5-aza-dC组和10μmol/L 5-aza-dC组SPCA-1细胞的凋亡率分别为(0.23±0.10)%、(15.09±0.26)%和(34.9±0.32)%;H446细胞凋亡率分别为(0.77±0.10)%、(14.82±0.23)%和(35.4±0.30)%,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论抑癌基因RASSF10在人肺癌细胞系中发生启动子甲基化,5-aza-dC能有效恢复RASSF10表达,抑制肺癌细胞增殖、诱导凋亡。

• 单位
  安康市中心医院