摘要
目的 观察人参多糖对大鼠小肠上皮细胞(IEC-6)渗透性、黏附连接蛋白表达及细胞钙离子(Ca2+)水平的影响,探讨益气健脾中药人参肠黏膜保护作用机制。方法 设置不同实验条件[正常含钙培养、含钙培养+二氟甲基鸟氨酸(DFMO)、无钙培养]以观察人参多糖的作用;Transwell小室酚红透过法检测细胞间渗透性;Western blotting法检测黏附连接蛋白(E-cadherin、α-catenin和β-catenin)表达;激光共聚焦显微镜观察细胞Ca2+水平。结果 (1)正常含钙培养时,人参多糖(40、80、160 mg·L-1,下同)能降低细胞间渗透性、提高E-cadherin、α-catenin和β-catenin表达及细胞Ca2+水平(P<0.05或P<0.01);(2)含钙培养+DFMO负荷时,细胞间渗透性增加、E-cadherin和α-catenin表达及Ca2+水平降低(P<0.05或P<0.01),人参多糖可改善DFMO所致的细胞间渗透性增加、E-cadherin和α-catenin表达及Ca2+水平降低(P<0.05或P<0.01);(3)无钙培养可致细胞间渗透性增加及E-cadherin、α-catenin和β-catenin表达降低(P<0.05或P<0.01),人参多糖可改善无钙培养所致的细胞间渗透性增加及E-cadherin和α-catenin表达下降(P<0.05或P<0.01)。结论 人参多糖具有增强肠上皮屏障的作用,其机制与提高细胞Ca2+水平及黏附连接蛋白表达有关。
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