摘要
目的 建立基于氧化型3,3’,5,5’-四甲基联苯胺(3,3’,5,5’-tetramethylbenzidine,TMB)的比色和光热双模式谷胱甘肽(glutathione, GSH)检测方法,用于保健食品和果蔬中谷胱甘肽含量的快速检测。方法 利用普鲁士蓝(Prussianblue,PB)的过氧化物酶活性催化TMB与过氧化氢反应生成蓝绿色且具有光热转化性能的氧化型TMB。而GSH能将氧化型TMB还原为无色的TMB,使溶液吸光度值和光热转化产生的温升与GSH含量呈线性相关,实现比色法和光热法双模式定量检测GSH。结果 检测最优pH为3.5,反应时间为5min,PB质量浓度为1 mg/mL, 1 mL显色液中30%过氧化氢体积为2.5μL, TMB质量浓度为15 mg/mL,光热照射时间为70 s,照射功率为3.5 W,最优条件下比色法检出限为14.8μg/mL,光热法为1.1μg/mL,光热检测灵敏度较比色法提高约13倍,实际样品加标回收率在84%~119%之间。结论 该方法具有良好的重复性、特异性和准确性,可用于保健食品、果蔬中GSH的快速检测。
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单位生命科学学院; 山东师范大学