紫花牡荆素调节cAMP/PKA信号通路对OGD/R诱导的神经元损伤的影响

作者：宋海龙; 徐东为; 余秋男; 荆彦平; 李世冲; 刘建中; 刘京让

来源：卒中与神经疾病, 2023, 30(06): 557-576.

• 紫花牡荆素
• 环磷酸腺苷/蛋白激酶A信号通路
• 氧糖剥夺/复糖复氧
• 神经元损伤

目的 探讨紫花牡荆素(Casticin, CAS)通过调节环磷酸腺苷/蛋白激酶A信号通路(Cyclic adenosine monophosphate/protein kinase A,cAMP/PKA)对氧糖剥夺/复糖复氧(Oxygen glucose deprivation/recovery, OGD/R)诱导的神经元损伤的影响。方法 通过体外培养海马神经元(HT-22),进行OGD/R诱导处理建立神经元损伤模型，使用2～32μmol/L的紫花牡荆素处理细胞，筛选最佳实验水平；将细胞分为对照组(Control组)、模型组(OGD/R组)、紫花牡荆素低、中、高水平组(CAS-L组、CAS-M组、CAS-H组)、紫花牡荆素+cAMP/PKA信号通路抑制剂组(CAS+H-89组);采用细胞计数试剂-8(Cell counting kit-8,CCK-8)法检测细胞的增殖活力，倒置显微镜观察细胞形态，Hoechst染色及流式细胞术观察并计算细胞凋亡，酶联免疫吸附试验(Enzyme linked immunosorbent assay, ELISA)法检测过氧化氢酶(Catalase, CAT)、超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase, SOD)、肿瘤坏死因子-α(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-6(Interleukin-6,IL-6)以及cAMP水平，Western blot检测天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3(Aspartate-specific cysteine proteinase-3,Caspase-3)、PKA、磷酸化PKA(phosphorylated PKA,p-PKA)表达水平。结果 与Control组比较，OGD/R组HT-22细胞细胞核皱缩，细胞崩解，细胞存活率、CAT及SOD,cAMP,p-PKA表达水平显著降低，细胞凋亡率、TNF-α及IL-6,Caspase-3表达水平显著升高(P<0.05);与OGD/R组比较，CAS-L组、CAS-M组、CAS-H组HT-22细胞损伤减轻，细胞存活率、CAT及SOD、cAMP、p-PKA表达水平显著升高，细胞凋亡率、TNF-α及IL-6,Caspase-3表达水平显著降低，且呈水平依赖性(P<0.05);与CAS-H组比较，CAS+H-89组HT-22细胞损伤加重，细胞存活率、CAT及SOD,cAMP,p-PKA表达水平显著降低，细胞凋亡率、TNF-α及IL-6,Caspase-3表达水平显著升高(P<0.05)。结论 紫花牡荆素可以通过激活cAMP/PKA信号通路来减轻OGD/R诱导的神经元损伤。

• 单位
  黄河三门峡医院