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摘要
目的：人工区室化是代谢工程及合成生物学的重要技术手段，针对脂滴区室化技术未得到有效评价的现状，以产油微生物红法夫酵母为检验体系，评价筛选脂滴定位信号。方法：基于芝麻油质蛋白oleosin的三维结构及其跨膜结构域分析，设计短序列脂滴定位信号，构建定位信号与eGFP荧光蛋白基因融合的表达载体，转化红法夫酵母，采用荧光显微观察评价定位信号的定位功能。结果：完整的oleosin蛋白Ols1((1-145))和肽段Ols2((1-63))、Ols4((32-63))、Ols5((44-63))均能引导eGFP定位于红法夫酵母的脂滴内部，肽段Ols3((64-145))不能有效引导eGFP定位于脂滴，仅在细胞质中游离表达。结论：筛选得到了一个短序列脂滴定位信号Ols5((44-63)),其仅含19个氨基酸，能够有效引导eGFP定位于脂滴内部。
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