20β-羟基黄体酮的制备及孕激素样作用研究

作者：闫淑静; 陈春丽; 谢湘云; 高晓黎^*

来源：新疆医科大学学报, 2022, 45(06): 666-671.

• 20β-羟基黄体酮
• 同分异构体
• 大鼠子宫内膜基质细胞
• 孕酮受体
• 孕激素样作用

目的 制备20β-羟基黄体酮（20β-Hydroxyprogesterone, 20β-DHP），以大鼠子宫内膜基质细胞（Rat endometrial stromal cells, RESC）为研究载体，研究其孕激素样作用。方法 化学合成20-羟基黄体酮（20-Hydroxyprogesterone, 20-DHP），经半制备高效液相色谱分离制备20β-DHP，并对其进行含量测定。从雌性SD大鼠体内原代分离培养RESC，采用免疫荧光法对其进行鉴定、纯度检测，绘制生长曲线。RESC培养后分为空白组、阳性对照（黄体酮，Progesterone, P4）组、20β-DHP组、20α-DHP组，采用MTT法观察20β-DHP及其同分异构体20α-DHP对RESC增殖的影响，采用RT-qPCR法检测3种药物对孕酮受体（Progesterone receptor, PR）和增殖细胞核抗原（Proliferating cell nuclear antigen, PCNA）基因表达的影响。结果 分离得20β-DHP单体，纯度为96.27%。原代分离培养的RESC的免疫荧光结果显示标志蛋白Vimentin阳性，纯度在90%以上，活力良好。MTT结果显示20β-DHP及其同分异构体20α-DHP均可促进RESC增殖，且呈剂量依赖性，与P4作用类似；RT-qPCR结果显示20β-DHP及其同分异构体20α-DHP均可上调PCNA基因表达，下调PR基因表达（P<0.05）,20β-DHP仅在12 h内对PR表达具有下调作用。结论 20β-DHP及其同分异构体20α-DHP对RESC具有类似P4的孕激素作用，但20β-DHP对PR的下调作用受时间影响。

• 单位
  新疆医科大学