壳聚糖介导CrmA对软骨细胞凋亡的抑制作用研究

作者：门海龙; 邱波; **; 宋其合; 陈庆

来源：中华风湿病学杂志, 2013, 17(7): 477-480,后插2.

DOI：10.3760/cma.j.issn.1007-7480.2013.07.012

• 骨关节炎
• 壳聚糖
• 纳米粒
• 细胞凋亡
• 细胞因子反应调节因子A

目的 探讨壳聚糖-pCrmA纳米粒对白细胞介素(IL)-1β诱导的软骨细胞凋亡的影响.方法 制备壳聚糖-pDNA纳米粒并进行表征.荧光显微镜观察壳聚糖介导pIRES2-增强型绿色荧光蛋白(EGFP)在原代软骨细胞中的转染,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)实验分析壳聚糖-pIRES2-EGFP纳米粒的细胞毒性,蛋白印迹法分析壳聚糖介导的CrmA在软骨细胞中的表达,用原位末端脱氧核苷酸转移酶标记(TUNEL)法检测壳聚糖-pCrmA纳米粒对IL-1β诱导的软骨细胞凋亡的影响.采用单因素方差分析进行统计学分析.结果 壳聚糖-pDNA纳米粒的粒径为50 nm,壳聚糖-pDNA纳米粒中的pDNA在pH 2.0和pH 7.4缓冲液中呈双相释放.壳聚糖能够介导基因CrmA在软骨细胞中表达.壳聚糖-pDNA纳米粒无细胞毒性.壳聚糖-pcrmA纳米粒处理组软骨细胞凋亡率明显低于壳聚糖组(P＜0.05)与磷酸盐缓冲液组(P＜0.01).结论 壳聚糖是一种有效的非病毒基因载体,壳聚糖-pCrmA纳米粒能够显著抑制IL-1β诱导的软骨细胞凋亡.

• 单位
  清华大学深圳研究生院; 武汉大学人民医院