摘要

目的:探讨利用大鼠脂肪间充质干细胞体外构建细胞膜片方法,并分析细胞膜片的生物学特点。方法:从出生7d大鼠体内提取脂肪组织并获得纯化的脂肪间充质干细胞(ADSCs,adipose-derived mesenchymal stem cell),将ADSCs体外构建细胞膜片,待膜片成熟后采用倒置显微镜和HE染色对膜片进行形态学检测,实时定量PCR检测细胞COL-1、FN、FGF、VEGF的基因表达水平,Western Blot检测COL-1、FN、FGF、VEGF的蛋白表达情况。结果:纯化的ADSCs体外诱导培养10d后获得白色膜状细胞膜片,镜下观察见细胞复层生长,染色显示细胞间紧密连接并分泌大量细胞外基质(ECM,extracellular matrix)。Real Time-PCR结果表明细胞膜片组COL-1、FN、FGF、VEGF mRNA表达水平高于正常培养的ADSCs组。Western Blot蛋白学检测与基因检测趋势一致。结论:体外培养大鼠脂肪间充质干细胞能构建细胞膜片,膜片的COL-1、FN、FGF、VEGF表达水平显著高于对照组。

  • 单位
    北京军区总医院; 解放军总医院; 第三军医大学