Toll样受体4在A型流感病毒诱导的小鼠肺部炎症中的作用机制

作者：黄家望; 马心悦; 凡博砚; 刘卓琳; 王康宇; 冯芷莹; 孙贵香^*; 李玲^*

来源：中国病理生理杂志, 2023, 39(08): 1357-1365.

• A型流感病毒
• 肺部炎症
• Toll样受体4
• 髓样分化因子88
• 肿瘤坏死因子受体相关因子6

目的：通过研究A型流感病毒（influenza A virus, IAV）诱导的野生型（wild-type, WT）和Toll样受体4(Toll-like receptor 4, TLR4)敲除型（TLR4del）C57BL/6小鼠肺部炎症差异，探讨TLR4在IAV诱导的肺部炎症中的作用机制。方法：设立WT组和TLR4del组，用IAV滴鼻感染WT小鼠和TLR4del小鼠以构建小鼠肺炎模型，每组各48只。分别在感染0、1、3、5、7和9 d处理动物。常规法检测小鼠体质量，计算肺指数、脾指数和胸腺指数。使用苏木精-伊红（hematoxylin-eosin, HE）染色法检测不同时间点各组小鼠肺组织病理变化。ELISA实验检测小鼠支气管肺泡灌洗液中肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α, TNF-α)、白细胞介素1β(interleukin-1β, IL-1β)、IL-6和IL-8的含量，探讨不同时间点各组小鼠炎症因子的分泌情况。RT-qPCR、免疫组化和Western blot检测肺组织中TLR4、髓样分化因子88(myeloid differentiation factor 88, MyD88)和肿瘤坏死因子受体相关因子6(tumor necrosis factor receptor-associated factor 6, TRAF6)的mRNA和蛋白表达情况，进一步探讨TLR4在IAV感染诱导的小鼠肺炎模型中的作用机理。结果：与WT组小鼠相比，TLR4del组小鼠在感染3 d后的体质量、脾指数和胸腺指数显著上升（P<0.05），肺指数显著下降（P<0.05）。感染3 d后，与WT组小鼠相比，TLR4del组小鼠支气管肺泡灌洗液中TNF-α、IL-1β、IL-6和IL-8含量显著下降（P<0.05）。HE染色结果显示，敲除TLR4能减轻IAV感染的小鼠肺组织病理损伤。RT-qPCR、免疫组化和Western blot结果显示，与WT组相比，感染3 d后，TLR4del组小鼠肺组织MyD88和TRAF6的mRNA和蛋白表达水平显著下降（P<0.05）。结论：IAV感染诱导小鼠肺部炎症的损伤机制可能与TLR4介导的TLR4-MyD88-TRAF6信号通路有关。

• 单位
  湖南中医药大学