表达PRRSV ORF5和PCV2 ORF2基因的重组鸡痘病毒的构建及鉴定

作者：沈国顺; 金宁一; 庄天中; 韩贞珍; 李阳; 张金双

来源：中国预防兽医学报, 2007, 29(06): 405-409.

DOI：10.3969/j.issn.1008-0589.2007.06.001

• PRRSV ORF5
• PCV-2 ORF2
• 鸡痘病毒

分别将猪圆环病毒2型的ORF2基因和猪繁殖与呼吸综合征病毒的ORF5基因,插入到鸡痘病毒转移载体pUTA2-16-LacZ单一启动子和复合启动子下游,构建重组鸡痘病毒转移质粒pUTAL-ORF5-ORF2。将该重组质粒与鸡痘病毒282-E4株共转染鸡胚成纤维细胞,进行同源重组。通过3次溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)加压筛选,经RT-PCR、IFA和Western blot鉴定,表明重组鸡痘病毒中的目的基因在鸡胚成纤维细胞中得到表达,获得一株携带有目的基因ORF2和ORF5的重组鸡痘病毒rFPV-ORF2-ORF5。

• 单位
  军事医学科学院军事兽医研究所; 沈阳农业大学; 吉林大学