摘要
目的:探讨成熟树突状细胞(dendritic cells,DCs)是否存在非神经元性胆碱能系统及其调控机制.方法:分离正常小鼠骨髓细胞,体外用细胞因子(IL-4,GM-CSF)诱导、分化为幼稚DCs,细菌脂多糖(LPS)刺激其成熟.光镜观察其形态变化、流式细胞术进行分子鉴定.免疫细胞化学方法、免疫荧光抗体技术、流式细胞术和RT-PCR方法检测DCs烟碱样乙酰胆碱受体亚单位α7(nAChR α 7)、胆碱乙酰转移酶(ChAT)和乙酰胆碱酯酶(AChE).同时,流式细胞术检测美加明(MEC)作用于成熟DCs 12 h前后nAChR α 7表达.结果:成熟DCs表达nAChR α 7、ChAT、AChE蛋白和mRNA;nAChR α 7蛋白主要分布于细胞膜,ChAT和AChE分布于细胞浆.其中AChE蛋白表达强于ChAT(P<0.05),与nAChR α 7比较有上升趋势;MEC作用组nAChR α 7蛋白表达明显低于无MEC作用组(P<0.05).结论:成熟DC存在固有胆碱能系统,外源性因素(美加明等)可调节其效应.DCs可能通过胆碱能系统而发挥其神经免疫调节作用.
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