基于UPLC-QTOF-MS/MS和TCMIP的续断治疗类风湿性关节炎活性成分筛选及作用机制分析

作者：吴丹; 陈鸿; 江红; 张美琴; 时晨晶; 焦园园; 王萍^*; 许海玉^*

来源：中国实验方剂学杂志, 2021, 27(16): 131-140.

DOI：10.13422/j.cnki.syfjx.20211049

• 续断
• 整合药理学
• 类风湿性关节炎
• 化学成分
• 作用机制
• 炎症
• 胆汁酸

目的:依托超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱法(UPLC-QTOF-MS/MS)和中医药整合药理学研究平台(TCMIP),探讨续断治疗类风湿性关节炎(RA)的主要活性成分和作用机制。方法:采用UPLC-QTOF-MS/MS,分别在正、负离子扫描模式下对续断醇提液中的化学成分进行定性分析,流动相0.1%甲酸水溶液(A)-乙腈(B)梯度洗脱(0～10 min,0.2%～20%B;10～20 min,20%～40%B;20～25 min,40%～50%B;25～33 min,50%～98%B;33～35 min,98%～0.2%B),电喷雾电离源(ESI),扫描范围m/z 50～2 000;基于TCMIP,分别获取续断、肝肾阴虚证和RA的候选靶标群,进行"病-证-方"关联分析,富集得到主要药效成分及关键作用靶标,进一步进行蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络及生物功能富集分析。结果:在正、负离子模式下共鉴定了续断醇提液中81个化学成分;利用TCMIP收集到这些化学成分对应的283个候选靶标,RA对应的7个疾病基因,以及肝肾阴虚证相关的215个基因。经"病-证-方"关联分析及网络拓扑特征值计算等方式最终确定了17个关键活性成分,主要为续断皂苷类、脂肪酸类成分;其主要涉及7个核心靶标,即肿瘤坏死因子(TNF),核转录因子-κB亚单位1(NF-κB1),肝细胞核因子4α(HNF4A),核受体亚家族3C组成员1(NR3C1),过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARG),核受体亚家族1H组成员4(NR1H4)和核受体辅激活因子1(NCOA1),均与炎症相关,其中还有2个与胆汁酸途径相关;涉及的RA相关通路主要为PPARα激活基因表达等炎症通路,以及胆汁酸合成和代谢相关通路。结论:液质联用技术联合中医药大数据平台初步阐明了续断多成分对多条炎症通路和胆汁酸相关通路的调控作用,为续断治疗RA作用机制的深入阐释奠定了基础。

• 单位
  陕西国际商贸学院; 中国中医科学院中药研究所; 沈阳药科大学