胶质瘤SHG44细胞p110α表达及对增殖和转移潜能影响机制研究

作者：郑美娟; 杨宇石; 方艺; 赵艳; 李珀; 徐澍^*

来源：中华肿瘤防治杂志, 2019, 26(05): 295-300.

DOI：10.16073/j.cnki.cjcpt.2019.05.002

• p110α
• 胶质瘤
• 迁移
• 侵袭
• 增殖
• PI3K/AKT/mTOR

目的 p110α是磷脂酰肌醇-3-激酶(phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K)的重要成员,与肿瘤的发生发展密切相关,但目前关于p110α与胶质瘤关系的研究甚少。本研究旨在探讨p110α在胶质瘤中的表达情况,对胶质瘤SHG44细胞增殖、侵袭迁移的影响及其可能的作用机制。方法采用蛋白质印迹法检测正常胶质细胞HEB和胶质瘤细胞SHG44中p110α、P-AKT、AKT、P-mTOR、mTOR蛋白水平的表达。采用实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)检测HEB和SHG44中p110α、AKT、mTOR的mRNA水平。分别检测p110α特异性抑制剂PIK75处理SHG44细胞后,p110α及其下游相关因子的蛋白表达和mRNA水平。采用细胞增殖检测试剂盒8(cell counting kit8,CCK8)法检测细胞增殖能力。采用划痕实验、Transwell侵袭实验检测p110α对SHG44细胞迁移和侵袭的影响。结果 SHG44细胞中p110α、P-AKT、AKT、P-mTOR、mTOR蛋白表达均高于HEB,均P<0.05,且p110α、AKT、mTOR的mRNA水平均高于HEB细胞,均P<0.01。使用PIK75处理SHG44后,p110α、P-AKT、AKT、P-mTOR、mTOR蛋白表达较处理前均降低,均P<0.05,p110α、AKT、mTOR的mRNA水平较处理前均降低,均P<0.01。CCK8实验结果表明,不同浓度的PIK75均能抑制细胞的增殖,并呈剂量依赖性,均P<0.05。划痕实验结果显示,在0.25μmol/L PIK75中SHG44细胞迁移率为(22.43±1.55)%,低于SHG44细胞组的迁移率(54.12±10.79)%,差异有统计学意义,t=5.035,P<0.01。0.25μmol/L PIK75在Transwell侵袭实验中显示能抑制SHG44穿膜细胞数为20.67±1.22,低于SHG44细胞组的44.33±1.90,差异有统计学意义,t=18.14,P<0.001。结论胶质瘤中p110α高表达激活PI3K/AKT/mTOR信号通路并促进肿瘤细胞的增殖、迁移和侵袭,抑制p110α表达可降低胶质瘤恶性生物学行为,p110α可能成为胶质瘤药物治疗的新靶点。

• 单位
  贵州医科大学