氢醌对L-02肝细胞自噬的影响

作者：郑作兵; 张伟; 熊亮; 刘婷婷; 吴杨娜; 杨嘉辉; 胡恭华^*

来源：安徽医科大学学报, 2022, 57(09): 1425-1430.

DOI：10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2022.09.016

• 氢醌
• 肝细胞
• 自噬

目的 研究氢醌(HQ)对人L-02肝细胞自噬的影响。方法 用不同浓度HQ(0、10、20、40和80μmol/L)处理L-02细胞24 h后，采用透射电镜观察自噬体形成；采用mCheery-GFP-LC3B融合蛋白示踪自噬体形成；采用Western blot实验检测自噬标志蛋白LC3、Beclin-1、P62的表达；采用免疫荧光实验检测自噬蛋白LC3、Beclin-1、P62的亚细胞定位及表达。结果 透射电镜下，观察到HQ作用后L-02细胞自噬体和溶酶体增多。荧光显微镜下，GFP-LC3B点状黄色斑点数量随HQ剂量增加而增多，而红色片状斑点减少。Western blot结果显示，HQ提高L-02细胞LC3Ⅱ/LC3Ⅰ蛋白的比值水平，各处理组与对照组差异均有统计学意义(P<0.05);HQ对L-02细胞的Beclin-1和P62蛋白表达无明显影响(P>0.05)。免疫荧光实验结果显示，LC3和Beclin-1在L-02细胞的胞核和胞质中均有表达，HQ对L-02细胞内LC3和Beclin-1的亚细胞定位未产生影响，而40、80μmol/L的HQ则可诱导L-02细胞内的P62由胞质向胞核转位。结论 HQ诱导L-02细胞的自噬体增多，可能与其导致的自噬体清除障碍有关。

• 单位
  江西省预防医学重点实验室; 公共卫生学院; 赣南医学院; 南昌大学