阿托伐他汀对博莱霉素诱导大鼠肺成纤维细胞MMP-9及TIMP-1表达影响

作者：于鑫; 刘斌; 魏路清; 李振华

来源：中国急救复苏与灾害医学杂志, 2012, 7(12): 1131-1136,封3.

DOI：10.3969/j.issn.1673-6966.2012.12.011

• 肺纤维化
• 阿托伐他汀
• 成纤维细胞
• MMP-9
• TIMP-1

目的 本研究观察阿托伐他汀对博莱霉素诱导大鼠肺成纤维细胞的干预作用及其分泌的MMP-9、TIMP-1的影响,为探讨阿托伐他汀抗肺纤维化作用的机制提供实验依据.方法 博莱霉素制备大鼠肺纤维化模型,1周后处死,提取肺成纤维细胞,阿托伐他汀进行干预.MTT法测定细胞存活率;底物酶谱法分析IV型胶原酶的分泌及活性;[3H]-脯氨酸渗入评价脯氨酸含量的变化;RT-PCR检测细胞分泌的MMP-9、TIMP-1mRNA的表达;Western-blot检测细胞培养液中MMP-9、TIMP-1的蛋白表达.结果 阿托伐他汀具有显著抑制成纤维细胞增殖的作用,与对照组比较,1μM的阿托伐他汀组的细胞数降至(78.5±8)%(P<0.001),5μM组的细胞数降至(49.8±12.6)%(P<0.0001),10μM组的细胞数降至(36.1±10.7)%(P<0.0001),0.01μM和0.1μM的阿托伐他汀对细胞的抑制与对照组相比较无显著的差异,分别为(98.3±10.8)%(P=0.35),暴露于1μM(92.2±8.4)%(P=0.13).GelatinZymography明胶酶谱分析结果表明:和5μM的阿托伐他汀72h的肺成纤维细胞分泌的MMP-9分别减少至(79.11±14.39)%(P=0.1)和(56.74±12.98)%(P<0.01),(79.07±16.75)而MMP-2分别为(103.90±5.46)%,%;后者虽有下降趋势但并无统计学意义.Westernblot分析细胞培养液中MMP-9、TIMP-1酶活性示:暴露于1μM和5μM的阿托伐他汀72h的肺成纤细胞分泌的MMP-9分别减少至(84.67±11.74)%(P=0.31)和(29.15±6.03)%(P<0.05).TIMP-1分别减少至(48.89±1.92)%(P<0.01)和(30.37±2.80)%(P<0.001).Westernblot显示暴露于1μM和5μM的阿托伐他汀72h的肺成纤细胞分泌的胶原IV分别减少至(65.9±9.32)(P<0.05)、(42.6±8.5)%(P<0.01).与之类似,暴露于5μM的阿托伐他汀72h的肺成纤细胞分泌的纤维连接蛋白减少至对照组的(20.6±4.2)%(P<0.01).[3H]-脯氨酸渗入结果显示:1μM的阿托伐他汀减少脯氨酸的结合至(77.1±15.0)%(P<0.05),5μM的阿托伐他汀减少至(54.7±6.6)%(P<0.05).RT-PCR的分析阿托伐他汀对成纤维细胞的MMP-9、TIMP-1的mRNA表达的影响结果显示,不同浓度的阿托伐他汀处理肺纤维化成纤维细胞72h后MMP-9、TIMP-1mRNA表达均减少(P<005).结论 阿托伐他汀具有抑制博莱霉素诱导大鼠肺成纤维细胞增殖的作用,并能抑制成纤维细胞分泌的MMP-9、TIMP-1.

• 单位
  中国医科大学附属第一医院; 中国人民武装警察部队后勤学院附属医院