诃子水提物对高尿酸肾病大鼠的保护作用及机制研究

作者：刘豪; 沈娟; 刘文彬; 金小宝

来源：中药药理与临床, 2024, 40(10): 56-64.

DOI：10.13412/j.cnki.zyyl.20240412.004

• 诃子水提物
• 高尿酸肾病
• 网络药理学
• 分子对接
• 凋亡
• 硫酸奎尼丁

目的:探究诃子水提物改善高尿酸肾病大鼠的作用及初步机制。方法:通过中药系统药理学分析平台(TCMSP)获取诃子活性成分及靶点信息，GeneCards数据库收集高尿酸肾病相关靶点。利用STRING数据库进行蛋白互作(PPI)分析；运用Metascape平台进行基因本体(GO)和京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析；通过Cytoscape 3.7软件构建“诃子-活性成分-交集靶点-疾病”网络图。利用Autodock vina软件对诃子核心成分与关键靶点进行分子对接，并通过pkCSM数据库预测核心成分的ADMET性与类药性。采用氧嗪酸钾联合10%果糖诱导构建高尿酸肾病大鼠模型，通过对血清及尿液的肾功能指标检测及肾组织HE、PAS和Masson染色，验证诃子水提物的保护作用。采用CCK8、RT-PCR及Western blot等方法验证诃子水提物及其核心成分对尿酸诱导的HK-2肾损伤细胞模型及关键靶点的作用。结果:收集获得7个诃子活性成分，成分靶点70个，高尿酸肾病相关靶点878个，药-病交集靶点22个。GO富集分析表明，诃子主要影响白细胞凋亡、对有机环状化合物的细胞反应、对肿瘤坏死因子的反应等生物过程；发挥与蛋白质特定结构域结合、参与凋亡信号通路的半胱氨酸型内肽酶活性、BH3结构域结合等分子功能；涉及膜微区、转录调节复合物、受体复合物等细胞组分，进而起到治疗高尿酸肾病的作用。KEGG富集分析表明，诃子治疗高尿酸肾病涉及的主要通路为P53信号通路、凋亡信号通路等。TP53、ESR1、CASP8、CASP9和CASP3是诃子治疗高尿酸肾病的关键靶点。分子对接结果显示诃子核心成分与关键靶点具有良好的结合能力，且ADMET性与类药性分析表明核心成分均具有良好的成药性。动物实验表明，诃子水提物显著降低高尿酸肾病大鼠血清尿酸(SUA)、肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)和24 h尿蛋白含量(P<0.05或P<0.01),并改善肾组织病理损伤。细胞实验表明，诃子水提物及其核心成分有效提高了尿酸诱导的HK-2细胞活力，改善细胞状态。在分子水平上，诃子水提物显著下调了Casp8和Casp3 mRNA的表达(P<0.01),碎叶紫堇碱显著下调Tp53 mRNA的表达(P<0.01),而硫酸奎尼丁明显下调TP53、ESR1、CASP8、CASP9和CASP3蛋白和mRNA表达(P<0.05或P<0.01)。结论:诃子水提物能够改善高尿酸肾病大鼠的肾损伤，其作用机制可能是基于其核心成分硫酸奎尼丁通过抗凋亡途径实现的。

• 单位
  广东药科大学; 基础医学院