摘要
目的探讨延缓衰老基因Klotho对骨髓间充质干细胞(BMSCs)增殖和分化的影响。方法体外条件下培养大鼠骨髓间充质干细胞,构建分泌型Klotho(s KL)过表达的BMSCs。Western blotting检测细胞及培养基中s KL的表达; MTT法检测细胞增殖能力; Western blotting检测衰老标志物P53、P21蛋白的表达。利用成骨诱导液定向诱导BMSCs向成骨细胞分化,应用碱性磷酸酶(ALP)染色鉴定成骨效果;利用成脂诱导液定向诱导BMSCs向脂肪细胞分化,应用油红O染色鉴定成脂效果。结果 Western blotting结果显示,s KL组细胞和培养基中s KL蛋白表达显著上调(P<0. 05),P53、P21表达显著下调(P<0. 05); MTT结果显示,各组细胞吸光度值(A值)差别无显著性(P>0. 05),s KL组成骨及成脂能力明显强于对照组(P<0. 05)。结论 s KL增强了大鼠BMSCs的延缓衰老能力,对BMSCs的成骨分化和成脂分化产生一定的促进作用,而对BMSCs的增殖无显著影响。
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