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摘要
[目的]对乌梁素海沉积物中厌氧氨氧化细菌的PCR扩增方案进行优化。[方法]采集乌梁素海沉积物样品，提取细菌总DNA,以厌氧氨氧化细菌功能基因Hzo基因为研究对象，通过基于普通PCR和巢式PCR筛选适宜的引物、探究不同的PCR退火条件，确立PCR引物的最佳选择以及最佳扩增条件。[结果]以HzoAB4F/HzoAB4R为引物，PCR退火温度为53℃的条件下，能获得预期的600 bp左右的条带，但由于引物二聚体的出现，对于后续菌群结构的研究可能带来一些影响，因此该扩增策略还需要继续完善；其他引物进行的PCR反应扩增，获得的结果特异性均较差。巢式PCR方案(HzoAB1F/HzoAB1R为第一轮引物、HzoAB4F/HzoAB4R作为第二轮引物),PCR退火温度为55℃的条件下，可大大提高对厌氧氨氧化细菌功能基因Hzo扩增的特异性。[结论]成功对乌梁素海沉积物中厌氧氨氧化细菌功能基因Hzo进行扩增，研究发现巢式PCR方案适用于环境中厌氧氨氧化细菌的分子生态学研究。
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