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摘要
目的 制备肝癌细胞Hep1-6外泌体并对化疗药物阿霉素(DOX)进行包载，以期实现对肿瘤细胞更高的靶向活性与杀伤作用。方法 采用梯度离心法对肿瘤细胞Hep1-6来源的外泌体进行制备分离；采用透射电镜技术、表面标记蛋白表征以及纳米颗粒追踪分析技术对外泌体的形态、特征蛋白、粒径分布和浓度进行表征；采用电穿孔方法实现外泌体对DOX的有效包载，制备包载阿霉素外泌体(EXODOX)。采用CCK-8法检测EXODOX与DOX(0.5、1、2、3、5、10μg·mL-1)体外对Hep1-6细胞增殖的影响，采用激光共聚焦显微镜观察体外Hep1-6细胞对EXODOX与DOX(1μg·mL-1)的靶向摄取作用。结果所制备的外泌体具有形态良好、粒度均一的特性且具备外泌体特征膜蛋白CD63、 CD81、肿瘤易感基因101(TSG101)的表达；在电穿孔条件为150 V和75μF下外泌体对DOX具备良好的包载特性；相比于单独给药DOX，在同等质量浓度下EXODOX对Hep1-6细胞增殖抑制作用显著增强(P<0.05、0.01)，同时肿瘤细胞对EXODOX的摄取更具靶向性。结论 制备的EXODOX较DOX具有更强的体外细胞毒活性，EXODOX表现出对肿瘤细胞更高的靶向特性。
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单位生命科学学院; 北京中医药大学
