摘要
目的探讨紫杉醇-壳聚糖缓释膜(PTX-Chitosan Sustain film,PTX-CSF)对胆管成纤维细胞增殖和凋亡的影响。方法采用组织块法进行成纤维细胞的原代单细胞培养。将实验分为5组:未处理组,单纯PTX处理组(250nM)和低、中、高壳聚糖PTX缓释膜处理组(100nM、250nM、500nM)。使用噻唑蓝(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)比色法检测细胞的增殖情况,划痕实验检测紫杉醇对TGF-β1诱导细胞迁移的抑制作用,流式细胞术(flow cytometry,FCM)检测细胞的凋亡及细胞周期。结果紫杉醇-壳聚糖缓释膜能有效抑制胆管成纤维细胞的增殖,具有剂量和时间依赖性。其抑制作明显强于单纯的紫杉醇用药,且随着时间的延长,优势逐渐体现。紫杉醇-壳聚糖缓释膜能有效抑制TGF-β1对胆管成纤维细胞的促迁移作用,较单纯PTX组具有更长的时间效应。72h时,紫杉醇-壳聚糖缓释膜组成纤维细胞的凋亡率显著高于单纯PTX组和对照组(P<0.05),后2者之间无统计学差异。72h时,紫杉醇-缓释膜组和单纯PTX组的G2/M期细胞比例均较未处理组显著增加,2者相比,前者也明显高于后者,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论紫杉醇-壳聚糖缓释膜具有较强的细胞毒性作用及明显的缓释效果,可以维持较长时间的有效浓度,从而较单纯紫杉醇用药更能持续地抑制胆管成纤维的增殖。
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