基于Box-Behnken实验设计与响应面法优化禽流感疫苗生产工艺

作者：胡可可; 刘旭平; 蔡海波^*; 谭文松

来源：高校化学工程学报, 2019, 33(02): 394-399.

• MDCK细胞悬浮培养
• 禽流感病毒疫苗
• 部分析因实验设计
• 响应面方法
• BBD实验设计

为优化基于MDCK细胞无血清悬浮培养生产禽流感病毒的工艺以提高禽流感病毒血凝素(HA)滴度,采用部分析因实验设计考察了病毒生产工艺中接毒时细胞密度、TPCK-胰酶浓度、培养温度、感染复数和病毒收获时间对病毒HA滴度的影响,确定了接毒时细胞密度、TPCK-胰酶浓度、和病毒收获时间作为影响病毒HA滴度的显著因子,并进一步采用3因素3水平的Box-Behnken实验设计和响应面法,对3个显著因子作用条件进行了优化,获得了最优的工艺条件。结果显示:当接毒时细胞密度为7.0×106 cells×m L-1、TPCK-胰酶浓度为17 mg×L-1、病毒收获时间为60 h时,病毒HA滴度最高可达10.85 log2 HAU/25μL。以上研究结果为禽流感疫苗高效大规模工业化生产提供了有力的数据支持。

• 单位
  生物反应器工程国家重点实验室; 华东理工大学