怀地黄脱毒技术的优选

作者：苏秀红; 腊贵晓; 刘春朝^*; 董诚明^*; 陈随清

来源：植物生理学报, 2022, 58(03): 587-595.

DOI：10.13592/j.cnki.ppj.2021.0302

• 怀地黄
• 脱毒苗
• 茎尖
• 化学药剂
• 电流刺激

为筛选一种简单、快速、高效的怀地黄(Rehmannia glutinosa)脱毒方法,以烟草花叶病毒(TMV)、黄瓜花叶病毒(CMV)复合感染的怀地黄‘怀丰’组培苗1.5 cm左右的茎段(具1节、1叶)和具2个叶原基的茎尖分生组织为实验材料,对其分别进行化学药剂和电流刺激处理。化学药剂处理中,将其分别接入含有利巴韦林、2-硫脲嘧啶、阿昔洛韦的MS+0.5 mg·L-1 6-BA+0.1 mg·L-1 GA3+0.1 mg·L-1 NAA的培养基中进行培养,三种化学药剂均设置0、10、20、30 mg·L-1 4个浓度梯度;电流刺激处理中将上述两种材料分别用5、15、30 m A电流刺激0、1、5、10 min后接种到MS+0.5 mg·L-1 6-BA+0.1 mg·L-1 GA3+0.1 mg·L-1NAA培养基中;培养期间观察培养物的生长情况,30 d后统计其株高、生根情况等,并采用RT-PCR检测脱毒效果。结果显示:3种化学药剂对茎尖、怀地黄茎段的生长均有不同程度的抑制作用。尤其是2-硫脲嘧啶的抑制作用最为明显,当其浓度为20 mg·L-1时成苗率为20%,生长过程中部分植株出现死亡,30mg·L-1时,植株全部死亡。电流刺激不仅提高了怀地黄茎尖脱毒效果,且适当的电流处理可促进怀地黄植株的生长,特别是在15 m A、5 min的处理下,脱毒率为75%,且茎尖苗增殖了5倍。电流刺激茎尖处理获得的脱毒苗长势健壮,叶片浓绿,且叶片内毛蕊花糖苷、梓醇含量分别为病毒苗的1.65、3.03倍。因此电流刺激茎尖是一种快速、高效的怀地黄脱毒方法,该技术可为其他中药材脱毒苗的研究、生产应用提供示范参考作用。

• 单位
  河南中医药大学; 河南省农业科学院