摘要
目的探讨EphB4/EphrinB2对糖尿病视网膜病变(diabetic retinopathy,DR)大鼠视网膜新生血管生成的影响。方法取60只健康雄性SD大鼠,随机分为模型组、干预组和对照组,每组20只。模型组建立大鼠DR模型;干预组建立DR模型并于玻璃体内注射2μL sEphB4;对照组建立DR模型并于双眼玻璃体内注射2μL生理盐水。分别用ADP酶染色观察视网膜新生血管形态和分布,免疫荧光双标检测EphB4/EphrinB2蛋白的表达,Western blot检测EphB4蛋白的表达。结果各组视网膜新生血管观察结果显示,模型组和对照组大鼠视网膜毛细血管扩张、迂曲,出现微血管瘤并可见大量紊乱的新生血管,干预组视网膜血管形态接近正常,新生血管少见。模型组和对照组视网膜组织EphB4和EphrinB2蛋白呈高表达,干预组的EphB4和EphrinB2的蛋白表达量明显少于模型组和对照组,这说明sEphB4可以有效地抑制视网膜组织EphB4和EphrinB2蛋白的表达。模型组和对照组视网膜组织EphB4蛋白表达量较高,干预组DR大鼠视网膜组织中EphB4蛋白表达量明显低于模型组和对照组。整合光密度分析的结果显示,干预组EphB4蛋白与内参β-actin光密度值的比值(0.12±0.02)与模型组的比值(0.76±0.04)和对照组的比值(0.68±0.05)之间差异显著,均有统计学意义(均为P<0.01),而模型组和对照组差异无统计学意义(P=0.08)。结论 EphB4/EphrinB2蛋白过高表达与DR大鼠视网膜新生血管的生成密切相关,sEphB4可靶向阻断EphB4蛋白表达,并能有效抑制视网膜新生血管的生成。
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单位锦州医科大学; 爱尔眼科医院