聚乙二醇化重组人促红素不同位点修饰率的测定

作者：陶磊; 史新昌; 李响; 韩春梅; 周勇^*; 饶春明^*

来源：药物分析杂志, 2020, 40(09): 1697-1701.

DOI：10.16155/j.0254-1793.2020.09.23

• 聚乙二醇
• 重组人促红素
• 修饰率
• 液质肽图
• Lys-C蛋白酶
• 质量控制
• 液质联用
• 比对研究

目的:测定聚乙二醇化重组人促红素(PEG-EPO)中不同修饰位点的修饰率。方法:将重组促红素(EPO)及PEG-EPO样品分别用Lys-C蛋白酶进行酶切,在含0.1%三氟乙酸的流动相体系下液质联用测定液质肽图;通过质谱鉴定各肽段,在215 nm波长采集的肽图中积分计算各肽段的峰面积百分比;根据EPO及PEG-EPO肽图中对应肽段峰面积百分比的变化,利用软件计算各位点的修饰率。结果:所建立的方法成功计算出PEG-EPO中9个位点的修饰率。该方法还用于3家企业的产品比较,结果显示:3家企业的产品在PEG修饰方面的总体趋势一致,但在个别位点存在修饰率的差异,比如N-末端和Lys45。结论:该方法可用于PEG-EPO制品的常规质量控制,以及不同企业产品的比对研究。

• 单位
  中国食品药品检定研究院