重组蛋白中G418残留量超高效液相色谱-蒸发光散射检测方法的建立

作者：张旭凡; 王辉; 王志明; 魏敬双^*

来源：中国生物制品学杂志, 2020, 33(01): 71-75.

DOI：10.13200/j.cnki.cjb.002966

• 重组蛋白
• 超高效液相色谱-蒸发光散射法
• G418
• 残留量

目的建立定量检测重组蛋白中G418残留量的超高效液相色谱(ultra performance liquid chromatography,UPLC)-蒸发光散射检测(evaporative light scattering detection,ELSD)法,并进行验证。方法 G418经UPLC洗脱后,通过蒸发光散射检测器检测,首先将柱洗脱液雾化形成气溶胶,然后在加热的漂移管中将溶剂蒸发,余下不挥发性溶质颗粒在光散射检测池中进行检测,通过标准曲线计算质控品中G418浓度。对建立的方法进行专属性、重复性、中间精密度、定量限、耐用性、线性验证。结果 G418浓度在0. 01～0. 20 mg/m L范围内,标准曲线的线性较好,R2> 0. 99,定量限为0. 01 mg/mL;质控品的加样回收率在80%～120%之间;中间精密度试验回收率的RSD为3. 44%;定量限试验回收率的RSD为5. 38%;耐用性试验回收率的RSD为4. 56%。结论 UPLC-ELSD法精密度良好,可用于重组蛋白研发及生产过程中G418残留的监测。

• 单位
  华北制药集团新药研究开发有限责任公司