基于UPLC-Q-TOF/MS代谢组学和分子对接技术探索胆黄连“清肝胆实火”的物质基础

作者：董兆威; 田茂颖; 杨宇; 王瑾^*; 黄勤挽^*

来源：中国实验方剂学杂志, 2023, 29(23): 140-149.

DOI：10.13422/j.cnki.syfjx.20230748

• 胆黄连
• 肝胆实火
• 物质基础
• 代谢组学
• 分子对接技术
• 网络药理学
• 超高效液相色谱-四极杆-飞行时间串联质谱法(UPLC-Q-TOF/MS)

目的：采用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间串联质谱法（UPLC-Q-TOF/MS）代谢组学及分子对接技术研究胆黄连清肝胆实火的物质基础。方法：采用UPLC-Q-TOF/MS代谢组学技术分析黄连、清炒黄连和胆黄连的整体化学成分，流动相0.1%甲酸水溶液（A）-乙腈（B）梯度洗脱（0～2 min,5%B;2～20 min,5%～65%B;20～40 min,65%～10%B;40～45 min,10%B;45～46 min,10%～95%B;46～49 min,95%B），电喷雾离子源（ESI），正、负离子模式扫描，扫描范围m/z 80～1 200。在此基础上，结合偏最小二乘法-判别分析（PLS-DA）和方差分析筛选不同黄连炮制品之间的差异化合物。利用网络药理学和分子对接技术验证差异化合物与肝胆实火证的关联程度。结果：共鉴定了33个化学成分，包括2个酚酸类、5个结合型胆汁酸类、26个生物碱类。PLS-DA和方差分析确认差异化合物16个，其中11个生物碱、5个结合型胆汁酸。在京都基因与基因组百科全书（KEGG）数据库进行通路富集分析得到差异成分与“肝胆实火”相关的疾病通路8条，“成分-靶点-通路”网络分析得到关键靶点磷脂酰肌醇4,5-二磷酸3-激酶催化亚基α亚型（PIK3CA）；分子对接结果显示，11种生物碱成分与PIK3CA均具有良好的结合能力。结论：猪胆汁在胆黄连炮制中具有独特性，可以促进小檗红碱、二氢白屈菜红碱等11种生物碱的生成和溶出。结合分子对接结果和文献结果可认为小檗红碱、二氢白屈菜红碱、牛磺猪去氧胆酸等16个差异化合物是胆黄连清肝胆实火的物质基础。

• 单位
  成都中医药大学; 医药学院