摘要

为提升Nakazawaea ishiwadae GDMCC 60786产乙酸乙酯的能力,本研究通过物理诱变常压室温等离子体和化学诱变甲基磺酸乙酯、亚硝基胍筛选突变株。利用三丁酸甘油酯初筛、摇瓶发酵二筛和外加底物发酵三筛。同时,对突变株进行遗传稳定性、溶血性和耐药性体外安全性评价。结果表明:对出发菌株进行诱变处理,最终获得一株具有良好的遗传稳定性和体外安全性突变株N5,乙酸乙酯含量达到786.64 mg/L,葡萄糖转化率达到39.33%,与出发菌株相比,分别提高了1.96倍和26.15%。外加乙醇后,其含量为1426.81 mg/L。但是,外加乙酸后,该菌株不生长,并失去产酯能力,表明其对乙醇耐受性强于乙酸。同时发现24 h时,N5的酯酶、乙酰辅酶A和醇酰基转移酶活性均达到最大值。本研究构建了一套适用于该菌株的诱变体系。