mM-CSF及其剪切体对淋巴细胞白血病Ramos细胞增殖的抑制作用

作者：马翠花; 种靖慧; 廖金凤; 林永敏; 卫佳; 郑国光

来源：山东医药, 2015, 55(19): 1-4.

• 白血病
• Ramos细胞
• 巨噬细胞集落刺激因子
• 膜结合型巨噬细胞集落刺激因子
• 剪切体
• 细胞增殖
• 细胞周期

目的探讨膜结合型巨噬细胞集落刺激因子(mM-CSF)及其剪切体(mM-CSF-Δ)对淋巴细胞白血病Ramos细胞增殖的抑制作用。方法采用Overlap PCR法构建带有m M-CSF的真核表达质粒pTARGET-mM-CSF,再进一步构建胞内区截短30个氨基酸的表达质粒p TARGET-m M-CSF-Δ,并进行PCR及DNA双向测序鉴定。将空载体p TARGET、p TARGET-mM-CSF、pTARGET-mM-CSF-Δ质粒分别转染Ramos细胞,经G418筛选稳定表达细胞株,并用RT-PCR、Western blotting进行鉴定;MTT法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞周期。结果成功构建了m M-CSF和m M-CSF-Δ的真核表达载体,获得了稳定转染细胞株Ramos-V、Ramos-M和Ramos-Δ。Ramos-M、Ramos-Δ、Ramos-V细胞增殖能力的OD值分别为0.413±0.014、0.384±0.019、0.463±0.037,Ramos-M细胞与Ramos-Δ细胞比较,Ramos-M、Ramos-Δ细胞分别与Ramos-V细胞比较,P<0.05或<0.01。Ramos-M、Ramos-Δ、Ramos-V细胞处于G0/G1期的比例分别为41.54%±1.22%、45.60%±1.09%、39.20%±1.53%,Ramos-M细胞与Ramos-Δ细胞比较,Ramos-M、Ramos-Δ细胞分别与Ramos-V细胞比较,P<0.05或<0.01。结论 mM-CSF、mM-CSF-Δ均能抑制淋巴细胞白血病Ramos细胞增殖,且后者抑制作用更强。

• 单位
  秦皇岛市第一医院; 中国医学科学院血液学研究所