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摘要
目的探讨黄曲霉素产毒真菌DNA的提取方法,并建立其多重聚合酶链式反应(PCR)检测体系。方法优选最佳DNA提取试剂盒和样品处理方式;根据杂色曲霉1(Ver-1)、杂色曲霉B(VerB)、ITS序列分别设计多重PCR引物,优化PCR体系,评价引物的特异性和灵敏性,以黄曲霉素产毒真菌验证体系的适用性。结果液氮研磨后,以Ezup柱式真菌基因组DNA抽提试剂盒提取效果最佳;所设计的多重PCR引物特异性良好,灵敏度达到1 ng/μL,该体系在7 d内的重复性和稳定性均良好。结论所建立的多重PCR检测体系可用于黄曲霉素产毒真菌的测定,可快速检出该类真菌。
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