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摘要
目的探讨干扰miR-130b的表达对宫颈癌细胞顺铂敏感性的影响及作用机制研究。方法 qRT-PCR检测miR-130b在98例宫颈癌和配对的癌旁组织中的表达水平,分析miR-130b的表达水平与患者临床病理参数的关系。miR-130b的表达与患者化疗有效率的相关性。常规培养宫颈癌HeLa细胞进行各组抑制物(inhibitor)的转染,分为对照组(NC组)和miR-130b抑制组(miR-130b inhibitor组),采用不同剂量的顺铂处理各组细胞48 h,MTS检测各组细胞的存活率和顺铂IC50值。采用顺铂处理NC和miR-130b组细胞48 h,流式细胞仪检测各组细胞的凋亡率,western blotting检测各组细胞中耐药相关蛋白ABCG2和凋亡相关蛋白活化caspase-3、活化caspase-9、Bcl-2和Bax蛋白的表达。结果 miR-130b在宫颈癌组织中的表达高于在癌旁组织中的表达(P<0.05),与宫颈癌患者的临床分期、淋巴结转移和远处转移相关(P<0.05)。miR-130b高表达组患者的化疗有效率低于miR-130b低表达组(P<0.05)。与NC组比较,干扰miR-130b的表达降低顺铂作用下HeLa细胞的存活率和HeLa细胞对顺铂IC50值(P<0.05)。与NC组比较,干扰miR-130b的表达促进顺铂作用的细胞凋亡率(P<0.05)。与NC组比较,干扰miR-130b的表达抑制顺铂作用细胞中ABCG2和Bcl-2蛋白的表达,促进顺铂作用细胞中cleave-caspase-9和cleave-caspase-3蛋白的表达(P<0.05)。结论 miR-130b可能通过调控耐药和凋亡相关蛋白增加宫颈癌细胞顺铂敏感性,是治疗宫颈癌的潜在靶标。
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