两种重组腺相关病毒介导增强型绿色荧光蛋白转染大鼠成骨细胞效率的体外研究

作者：蒋星; 杨昌永; 毛棉; 刘强强; 王莉

来源：四川大学学报（医学版）, 2010, (02): 203-207.

DOI：10.13464/j.scuxbyxb.2010.02.022

• 重组腺相关病毒
• 增强型绿色荧光蛋白
• 成骨细胞
• 转染 Recombinant adeno-associated virus Enhanced green fluorescent protein OsteoblastTransfection

目的比较2种不同重组腺相关病毒(rAAV)介导的增强型绿色荧光蛋白(EGFP)对大鼠成骨细胞的转染效率,评价其作为成骨细胞病变基因治疗载体的可行性。方法采用Ⅰ型胶原酶阶段消化法分离培养大鼠成骨细胞并鉴定,rAAV-EGFP按转染复数(MOI)1×103、1×104、1×105、5×105分为只加rAAV和rAAV与腺病毒(ADV)共同转染组转染成骨细胞,倒置荧光显微镜观察转染后荧光强度随转染时间的变化,流式细胞仪检测rAAV2/6-EGFP和rAAV2/9-EGFP对成骨细胞的转染效率及荧光强度,确定转染的较佳MOI值,以此值用MTT法描绘细胞生长曲线,观察rAAV对细胞的毒性。结果分离培养的...

• 单位
  四川大学; 国家成都中药安全性评价中心