乙型肝炎核心抗原为载体进行丙型肝炎混合性治疗疫苗的实验

作者：陈佳玉; 李凡

来源：中华传染病杂志, 2007, 25(03): 137-142.

DOI：10.3760/j.issn:1000-6680.2007.03.003

• 肝炎，丙型
• 疫苗
• 表位，T淋巴细胞
• 肝炎核心抗原，乙型

目的以HBcAg为载体进行丙型肝炎混合性治疗疫苗的实验研究。方法利用DNA重组技术将HCV T表位(131～140位氨基酸)和(1 445～1 453位氨基酸)分别插入HBcAg el-loop处,构建病毒颗粒样抗原表达载体pTrc-core-T1和pTrc-core-T2,并在大肠埃希菌DH5α中表达,蔗糖密度梯度离心提取纯化表达产物HBcAg-T1和HBcAg-T2。以T1和T2表位肽混合物、HBcAg- T1和HBcAg-T2混合蛋白免疫Balb/C小鼠,并设空白对照,适时行抑瘤实验;流式细胞仪检测CD4~+、CD8~+、IL-4及IFN-γ、IL-5,ELISA法检测IL-12;并行细胞杀伤实验,以观察混合蛋白的免疫原性。结果PCR法鉴定质粒pTrc-core-T1和pTrc-core-T2正确。抑瘤实验中HBcAg-T1和HBcAg-T2混合蛋白免疫组仅1只小鼠形成瘤块,直径0.1 cm,低于对照组的平均直径1.3 cm、T1T2混合肽免疫组的0.9 cm;混合蛋白免疫组脾细胞内CD8~+T细胞占(20.21±2.01)%,高于混合肽免疫组的(15.33±1.45)%和空白对照组的(5.09±1.66)%(P<0.01);3组内脾细胞内IFN-γ阳性细胞百分比分别为(1.58±0.05)%、(0.88±0.02)%和(0.53±0.03)%(P<0.01);血清中IL-5较混合表位肽组有所下降(P<0.01);而ELISA检测混合蛋白组IL-12高于T1T2混合表位肽免疫组;混合蛋白免疫组小鼠HCV特异细胞毒性T淋巴细胞(CTL)活性明显高于T1T2混合表位肽免疫组(P<0.01)。结论HBcAg-T1和HBcAg-T2混合蛋白诱导出高水平的细胞免疫应答,可作为HCV治疗性疫苗的候选。

• 单位
  基础医学院; 吉林大学